葡萄球菌皮膚燙傷樣綜合征(staphylococcalscaldedskinsyndrome,ssss)是由金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的表皮剝脫毒素引起,主要發(fā)生于嬰幼兒的嚴(yán)重感染,該病來勢兇猛,若不及時(shí)治療預(yù)后不良。所以,早期、快速、準(zhǔn)確的診斷,對縮短病程、降低患兒死亡率具有重要意義。
1材料與方法
1.1研究對象1999年3月至2001年2月臨床診斷為ssss,未用過抗生素及其他藥物的患者共34例,男性18例,女性16例,年齡14d~12歲,平均5.21歲。37例膿皰瘡患者和11例非金黃色葡萄球菌型中毒性表皮壞死松解癥患者。
1.2標(biāo)本采集ssss患者取原發(fā)皮損的滲液或痂皮、水皰液各1.5ml。膿皰瘡患者取原發(fā)皮損的膿液或痂皮。非金黃色葡萄球菌型中毒性表皮壞死松解癥患者取水皰液各1.5ml。標(biāo)本均取2份,其中一份直接接種于肉湯培養(yǎng)基中,用于elisa檢測毒素,另一份用于pcr。
1.3引物選取編碼剝脫毒素a(eta)、剝脫毒素b(etb)蛋白的基因剝脫毒素a基因(eta)、剝脫毒素b基因(etb)的特定核苷酸序列為引物,由上海生工生物工程公司合成并純化。引物1,5′2ctatttactgtaggagctag-3′,引物2,5′2atttatttgatgctctctat23′,引物1和引物2特異性擴(kuò)增片段長度為741bp,用于檢測eta。引物3,5′2atacacacattacggataat23′,引物4,5′2caaagtgtctccaaaagtat23′,引物3和引物4特異性擴(kuò)增片段長度為629bp,用于檢測etb。