（一）檢驗方法

1.樣品采集

以無菌方法采取具代表性的樣品，置滅菌的容器內(nèi)。一般采集患者糞便、嘔吐物和中毒的可疑原因食品。常見可疑的食品有魚、蝦、蟹、貝等海產(chǎn)品及其他有關(guān)的食品。若上述食品均為煮熟品，也可檢驗它們的包裝物、烹調(diào)用具等。

副溶血弧菌不宜在低溫環(huán)境中生存，故采集到的樣品應(yīng)盡快送往實驗室，不宜冷凍保存運送，以免影響檢驗結(jié)果。

2.分離培養(yǎng)

副溶血弧菌營養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基、蛋白胨水中均可生長。在含鹽3.5%的培養(yǎng)基上生長良好，0.5%鹽時可生長，12%以上及無鹽的培養(yǎng)基中不能生長。發(fā)育溫度為30-37~c，以37~c最佳。生長的ph范圍是7.0-9.5，最適ph為7.7～8.0，需氧性強，厭氧生長很緩慢。多數(shù)菌株于肉湯、蛋白胨水等培養(yǎng)基中呈渾濁表面形成菌膜。r型菌發(fā)生沉淀。厭氧培養(yǎng)48h以上，才見生長。固體培養(yǎng)基上菌落常呈圓形隆起，不透明，表面光滑、濕潤，多數(shù)菌株繼代后，呈不正圓。粗糙型菌落，灰白半透明或不透明，在emb瓊脂上不生長。某些菌株在麥康凱培養(yǎng)基上不生長。生長者，其菌落為圓形、平坦、半透明或渾濁略帶紅色。從腹瀉病例初次分離到的菌落多較典型一般不形成色素。食品中分離到的菌株，多為r型。膽酸鹽稍有阻止該菌擴散的作用，血平板上可見溶血環(huán)。在氯化鈉蔗糖平板上菌落呈綠色。s.s瓊脂上菌落中等大，無色透明、扁平、有動性，不易被接種環(huán)挑起。該菌對乙酸，90%以上菌株對0/129抑制弧2，4-二氨基-6，7-二異丙基喋啶）敏感。該菌的溶血作用是因其具有耐熱性溶血素，這種溶血素是相對分子質(zhì)量約為42000的酸性蛋白質(zhì)，對心臟有毒性，是一種即時型致死毒。

（二）動物試驗

經(jīng)上述試驗符合副溶血性弧菌的菌株接種于3.5%nacl蛋白胨水中，經(jīng)16-18h培養(yǎng)后，小鼠腹腔注射0.3ml，觀察2-3天。小鼠癥狀為豎毛，不活潑，食欲不振，腹部貼飼養(yǎng)罐底，呼吸困難，步態(tài)蹣跚有時呈痙攣性跳動、四肢抽搐及尾部痙攣性振動，多于24-48h內(nèi)死亡，將死亡小鼠作剖檢與分離培養(yǎng)。